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祿米 防污染實(shí)驗(yàn)室整體裝修設(shè)計(jì)LUMI894
詳細(xì)信息PCR防污染實(shí)驗(yàn)室整體裝修設(shè)計(jì)
PCR技術(shù)是通過對(duì)基因的選擇性片段進(jìn)行體外高效擴(kuò)增，實(shí)現(xiàn)目的基因的檢測(cè)。熒光探針定量PCR（FQ-PCR）是一種新的基因定量檢測(cè)技術(shù)，是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針，巧妙地把核酸擴(kuò)增（PCR）與光譜技術(shù)結(jié)合在一起，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)目的基因的準(zhǔn)確定量檢測(cè)，正發(fā)展成為臨床實(shí)驗(yàn)診斷的常規(guī)技術(shù)。 防污染是PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、建造、管理的重點(diǎn)。
PCR實(shí)驗(yàn)室污染的原因主要來自于幾方面：標(biāo)本間交叉污染、PCR試劑的污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染等、氣溶膠污染等。
防污染措施主要包括：
一、科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)。將試劑準(zhǔn)備、樣品制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析進(jìn)行分區(qū)，特別注意樣品制備及產(chǎn)物分析與其它區(qū)嚴(yán)格分離，并設(shè)置緩沖區(qū)，通過氣流自動(dòng)控制，確保實(shí)驗(yàn)室空氣流向試劑準(zhǔn)備→樣品制備→擴(kuò)增→產(chǎn)物分析區(qū)。其工作服、實(shí)驗(yàn)用品及吸樣槍應(yīng)專用，實(shí)驗(yàn)前用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。
二、吸樣槍。吸樣槍污染是一個(gè)值得注意的問題，由于操作時(shí)不慎將樣品或模板核酸吸入槍內(nèi)或粘上槍頭是一個(gè)嚴(yán)重的污染源，因而加樣或吸取模板核酸時(shí)要十分小心，吸樣要慢，吸樣時(shí)盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。
三、預(yù)混和分裝PcR試劑。所有的PCR試劑都應(yīng)小量分裝，如有可能，PCR反應(yīng)液應(yīng)預(yù)先配制好，然后小量分裝并-20℃保存，以減少重復(fù)加樣次數(shù),避免污染機(jī)會(huì)。另外，PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱。
四、防止操作人員污染。使用一次性手套、吸頭、小離心管應(yīng)一次性使用。
五、設(shè)立適當(dāng)?shù)年?yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。陽(yáng)性對(duì)照以能出現(xiàn)擴(kuò)增條帶的較低量的標(biāo)準(zhǔn)病原體核酸為宜，并注意交叉污染的可能性，每次反應(yīng)都應(yīng)有一管不加模板的試劑對(duì)照及相應(yīng)不含有被擴(kuò)增核酸的樣品作陰性對(duì)照。
六、選擇質(zhì)量好的 Eppendorf管，以避免樣本外溢及外來核酸的進(jìn)入，打開離心管前應(yīng)先離心，將管壁及管蓋上的液體甩至管底部，開管動(dòng)作要輕,以防管內(nèi)液體濺出。
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